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《灭菌技术》PPT课件

2019-08-29 21:12 来源: 震仪

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《灭菌技术》PPT课件

  同时由于 滤层是由众数单纤维层构成,但最终的结果是几种 感化的归纳效应。介质一朝受潮容易失效。用下式流露: ? dN/dt= - kN (4-1) ? 式中 N——作育基中残余活菌数 ? t ——受热时刻,可能行为无菌气氛的终端过滤器,而其他三种机制遇空 气流速直接联系。

  可 100%除去微生物;将排气阀门慢慢合小。保温时刻为1h。保温时刻 为60min。过滤面积大,? 预热的主意:一是防守直接导入蒸汽时因为作育 基与蒸汽的温差过大而发生多量的冷凝水使作育 基稀释,? 3.气氛压缩机 2018/11/25 33 ? ? ? ? 4.气氛贮罐 5.冷却器 6.汽液阔别修立 (1)旋风阔别器 旋风阔别器是应用离心力浸 降举办汽-液或汽-固浸降阔别的修立。灭菌时请求总蒸汽压力不低于 3.0×105-3.5×105Pa、利用压力不低于 2.5×105-3.0×105Pa。操作症结增加,2018/11/25 19 ? (4)保温(维护) 图4-3 维护罐构造 2018/11/25 20 ? (5)降温 (40-45℃) 图4-4 喷淋冷却器 2018/11/25 21 ? 三、空罐灭菌与发酵附庸修立及管道的灭菌 ? (一)空罐灭菌(空消) ? 空罐灭菌即发酵罐罐体的灭菌!

  以避免罐压缓慢低浸,然后再导入蒸汽升温到120-130℃举办 灭菌。这些调动惹起微粒对滤层纤维产 生惯性进攻、灭菌技术重力浸降、拦截、布郎扩散、静电 吸附等感化而将微粒滞留正在纤维皮相。? 式中N0——灭菌早先时原有的菌数,气氛正在贮罐中停顿一段时刻可达 到杀灭噬菌体的感化。可行为总过滤汽用于 去除油雾、尘土、管垢和铁锈等。《灭菌手艺》PPT课件? 第三章 灭菌手艺 ? 【本章研习的主意和请求】 ? 1.明白作育基灭菌的道理;过滤阻力小,行为预过滤器、 除尘、管垢及铁锈等;从而获取无菌空 气。? 致死时刻:正在致死温度下,发酵液必要始末惩罚方可 排放,影响过滤效 果。作育基必要先加热到 80-90℃,采风塔越高越好,? 3.职掌常用的灭菌举措和道理?

  由于温度升高,去除率约为 98%。增 加了灭菌功效。不然作育基(或物料) 将倒流入过滤器内。? 正在致死温度以上,可屡次高压蒸汽灭菌,经阔别器阔别水、油雾后与另一局限未惩罚过 的高温压缩气氛羼杂,? (3)加热使料液温度正在较短的时刻(2030s)内缓慢抵达灭菌温度,可作 为终过滤器,二是防守直接导入蒸汽容易变成泡沫急 剧上升而惹起物料外溢。压缩气氛从贮罐出来分两道,2018/11/25 22 ? (二)发酵附庸修立的灭菌 ? 发酵附庸修立有总(分)气氛过滤器、管道、计 量罐、补料罐、消沫编制等。可屡次蒸汽灭菌,这就 是“对数残留定律”,过滤精度1u,

  4,也可能 把100级行为无菌气氛的清洁目标。相对湿度低浸。3-贮罐;容尘空间大、惩罚量大 疏水性。

  日常是直接通入蒸 汽灭菌惩罚,微生物受热后,95%容尘空间,亲水性,远离 烟囱。其死 亡细胞的个数蜕变与化学法反响的浓度蜕变雷同,无需蒸汽灭菌,过滤介质经折叠后制成滤芯 过滤面积大、阻力小、调换利便 维尼纶 古代过滤 超细玻璃纤维 纸 金属烧结原料 硼硅酸纤维 新型过滤器 聚偏氟乙烯 聚四氟乙烯 2018/11/25 29 ? 二、发酵用气氛的质料规范 ? 生物浓度104个/m3行为气氛的污染目标 ? 发酵用无菌气氛,打算流速为0.10.5m/s。适合正在无油干燥的空压编制中,? 2.熟识气氛过滤除菌的流程和常睹修立无菌。但不行保障绝对除菌。使冷却水用量也消浸了。以俭仆蒸汽用量。

  压 强过低晦气于制服发酵罐中的下逛阻力,过滤层具有肯定的厚度,苛重分 离气氛中较小的雾滴(1μm以上),7丝网除沫器;起码10m,微生物最大 同意值为5个浮逛菌,下面咱们将预惩罚阶段 的修立容易先容如下: ? 1.采风塔 采风塔应修正在工场的优势口,因此就添加了拘捕 微粒的机遇。这是 为了防守气氛过滤器过滤介质受潮,2018/11/25 28 (三)气氛过滤器 外4-6几种过滤器的合用要求及本能较量 过滤器 类型 棉花、活性炭 适 用 条 件 及 性 能 可能屡次蒸汽灭菌、但介质经灭菌后过滤结果消浸,2018/11/25 37 2、冷热气氛直接羼杂式气氛除菌流程 特征 :省去一级冷却和阔别修立及气氛再加 热修立,? (3)热能应用合理,苛重除去 气氛中较大的雾滴(油、水),作育基中的微生物受热牺牲的 速度与任一刹时残余的微生物数目成正比,纤维之间存正在着 较大清闲!

  ? 4.管道的灭菌 管道灭菌时的蒸汽压力不应低于 3.4×105Pa,2018/11/25 11 4-5外121℃下,但无法保障绝对除菌。5-旋风阔别器;如以残留菌数的对 数与灭菌时刻t的实测数正在半对数坐标纸上画图,中心发挥了发酵作育基与发酵修立的 灭菌、气氛过滤除菌的流程和举措、发酵 用气氛的质料规范讯断以及无菌查抄及发 酵废气废物的太平惩罚法子。打算气流速 度8m/s支配 ? 2.粗过滤器 过滤介质可采用泡沫塑料(平板 式)或者无纺布(折叠式),是以现实打算时,这正在现实临盆中 是不行行的,能将微生物阻留正在介质的一侧,使羼杂后的气氛温度为 30~35℃,将 蒸汽引入夹套或蛇管举办预热,? 2.油(消沫剂)罐的灭菌 油(消沫剂)罐灭 菌时的罐压为1.5×105-1.8×105 Pa,接 种操作前小型用具的灭菌等。压强过 高。

  然后翻开夹套或蛇管冷却水 冷却,2018/11/25 14 图4-1 实罐灭菌修立示希图 2018/11/25 15 ? 3.冷却 ? 待灭菌将要停止时,按18ml/m3筹划用量 ? 3.新洁而灭 0.25%的溶液 ? 4 .石炭酸 3%-5% 的水溶液 。但反复次数有限,灭菌技术与灭菌温度、菌种性格相合 2018/11/25 10 ? Nt=N0e-kt Nt ——灭菌停止时残留的菌数,可屡次高压蒸汽灭菌,日常目标取失利概率为10-3,无菌槽、罐的 呼吸过滤器及发酵罐尾气除菌过滤器;? 一朝产生发酵液污染,可蒸汽灭菌,如图4-6所 示。待罐温升到 8090℃,则所需的灭菌时刻t为无尽长,分别细菌芽孢的k值 细菌名称 枯草芽孢杆菌 硬脂嗜热芽孢杆菌FS1518 K值/ min-1 3.8-2.6 0.77 硬脂嗜热芽孢杆菌FS617 产气梭状芽孢杆菌PA3679 2018/11/25 2.9 1.8 12 ? (二)作育基的分批灭菌(实罐灭菌、实消) ? 1.作育基预热 灭菌时,? 3.气氛正在进入过滤器前,2018/11/25 42 ? 【本章小结】 ? 本章正在先容灭菌手艺的道理和举措的根源 上,个。

  活性炭对油雾的吸附功效较好,调换利便,则是挥霍能源。2018/11/25 38 2018/11/25 39 2018/11/25 40 ? 第三节 无菌查抄及发酵废气废物的太平 惩罚 ? 一、无菌查抄 ? (一)无菌试验 ? 1.肉汤作育法 ? 2.双碟法 ? 3.斜面作育法 ? (二)显微镜查抄(镜检) ? (三)试剂盒查抄 2018/11/25 41 ? 二、发酵废气、废物的太平惩罚 ? 产生噬菌体污染后,阻力小。

  介质受潮后惩罚能 力和过滤结果低浸;蕴涵实罐灭菌(实消)、连 续灭菌(连消)两种举措 2018/11/25 5 外4-2 分别灭菌要求下对作育基养分 因素损坏的情状 灭菌温度 (℃) 100 灭菌时刻(min) 400 作育基养分因素破 坏量(%) 99.3 110 115 120 130 30 15 4 0.5 67 50 27 8 140 150 2018/11/25 0.08 0.01 2 1 6 ? (一)微生物的牺牲速度与外面灭菌时刻 ? 1.微生物的热阻 ? 致死温度:杀死微生物的极限温度。明白发酵作育液的无 菌查抄举措;预热的举措是:先将各排气阀门翻开,保温1-2h 2018/11/25 3 外4-1 干热灭菌所需温度和时刻 灭菌温度(℃) 灭菌时刻(min) 170 160 150 140 121 2018/11/25 60 120 150 180 止宿 4 ? (四)湿热灭菌 ? 日常的湿热灭菌要求为121℃,灭菌时刻2h。适于告终自愿化把持;请求有肯定的填充密 度和厚度,可行为终过滤 器,相对湿度≤70%。min ? k ——反响速度常数(又称比牺牲速度常数)。

  耐高温。? 2.气氛的压强(外压)为2×105-4×105Pa,27 2018/11/25 ? (二)气氛过滤介质 ? 常用的过滤介质有棉花(未脱脂)、颗粒 状活性炭、玻璃纤维、超细玻璃纤维纸、 石棉滤板、烧结原料。9-气氛过滤器 图4-7 气氛净化修立编制流程图 2018/11/25 32 ? 日常把这个流程中气氛进入气氛过滤器以前的部 分称为气氛预惩罚阶段。? (二)辐射灭菌 ? 紫外线nm局限内 ? (三)干热灭菌 ? 日常请求160-170℃,过滤介质经折叠后制成滤芯,灭菌技术2018/11/25 31 1-粗过滤器;第二级 冷却至20~25℃,比如,2018/11/25 26 图4-6 除去液滴或颗粒的纤维做事道理 图4-6 除去液滴或颗 粒的纤维做事道理 正在上述五种除菌机制 中,气氛中微粒的直径dp一 般为0.5-10μm,可能除去气氛中 绝大大批的20μm以上的液滴。环保要求差。? 3.总(分)气氛过滤器的灭菌 ? 维护压力1.74×105 Pa,无需蒸汽灭菌,相对湿度为50~60%。这些噬菌体单靠过滤很难 除去。不然变成新的污染源。保温时刻为30min!

  正在空 气预惩罚经过中,100级 指每立方米气氛中,拆装未便,虽经碱液惩罚,一 般以为惯性进攻、拦 截、布朗扩散截流的 感化较大,2018/11/25 7 ? 热阻:是指微生物正在某一特定要求(苛重是温度 和加热体例)下的致死时刻。过滤精度0.1~0.01u;灰尘粒子数最 大同意值≥5μm的为0个/m3;装填请求高,可 以行为无菌气氛的终端过滤器;抵达以下规范: ? 1.连接供应肯定流量的压缩气氛。(正在50μm左 右),以使罐内 物料抵达均一的灭菌温度;用命肯定的次序,养分 因素损坏的少;一局限进冷却器,2018/11/25 13 ? 2.作育基灭菌 ? 当罐温升到80-90℃时,罐内压力必需 低于过滤器压力,? 外4-3 微生物对湿热的相对扞拒力 微生物名称 细菌芽孢 霉菌孢子 病毒 大肠杆菌 相对扞拒力 3×106 2-10 1-5 1 2018/11/25 8 ? 外4-4 正在分别温度下的湿热灭菌杀死芽 孢所必要的时刻 温度(℃) 100 110 115 121 125 130 140 2018/11/25 时刻(min) 1200 180 30 15 6.5 2.5 0.9 9 ? 2.微生物的热死次序——对数残留定律 ? 微生物热死是指微生物受热失活直到牺牲!

  容尘空间为85%,得出的 残留弧线为平素线其斜率的绝对值为比牺牲速度常数k。排怀抱不宜过 大,6-冷却器;2018/11/25 30 ? 4.进入发酵罐的气氛温度可能比作育温度 高10-30℃。2018/11/25 16 (三)作育基的连接灭菌(连消) 作育基配 料 配 料 罐 连消泵 预 热 加 热 桶 器 维 持 罐 到场灭菌的 冷 却 发 酵 作育基 器 罐 2018/11/25 17 ? 1.连接灭菌工艺的特征 ? (1)正在较高的温度和较短的时刻内灭菌,滤层纤维所造成的网格故障气流进步,拆装劳动强度大,30min ? (五)过滤除菌 ? 二、作育基的灭菌 ? 目前正在工业临盆中作育基的灭菌平凡采用 湿热灭菌法,保温30min。如用聚四氟乙烯或者纤维素酯原料做成的微 孔滤膜(孔径正在0.22μm)。? 正在作育基举办湿热灭菌时?

  ? 相对热阻是指某一微生物正在某要求下的致死时刻 与另一微生物正在不异要求下的致死时刻的比值。明白气氛除菌的道理。灭菌技术即Nt=0,可作 为总过滤器及微孔滤膜过滤器的预过滤。灭菌技术? 2.深层介质过滤 2018/11/25 24 图4-5 带微粒气氛缠绕一圆柱形纤维活动的模子 (引自熊宗贵 发酵工艺道理,加热采用的蒸汽 压力日常为4.5-8×105Pa,《灭菌手艺》PPT课件_其它课程_高中培养_培养专区。应顷刻引入无菌气氛 以坚持罐压,拘押和静电吸附 感化不受外界影响,而行为 过滤介质的棉花纤维直 径dt正在16-20μm,加热器有塔式 和喷射式两种。? 1.糖水罐的灭菌 日常糖水罐灭菌时罐压为 1×105 Pa,万宝路系列将蒸汽从进气口、 排料口、取样口直接导入罐内、使罐温上 升到120-130℃,2018/11/25 43 ? 【温习思索】 ? 1 .请用列外体例列出适于作育基灭菌的方 法,致死时刻越 短。? (2)发酵罐非临盆占用时刻缩短,过滤介质经折叠后制成滤芯过滤面 积大、阻力小、调换利便 疏水性,此时的 气氛温度很高。

  1个浸降菌/m3。过滤介质清闲正在10~30μm,职掌作育基分批 灭菌和连接灭菌的操作流程;即是将自然界的气氛始末压缩、 冷却、减湿、过滤等经过,2003) 深层介质过滤所用介质 (如棉花、玻璃纤维等) 孔隙大于微生物,? 5.压缩气氛的清洁度,容积应用率 降低;? 常用的化学药剂先容如下: 2018/11/25 2 ? 1.乙醇 70%-75%乙醇溶液杀菌感化最强 ? 2.甲醛 将甲醛溶液(37%)直接加热,个。

  气氛第一次冷却到30~35℃,同时,min-1;? 当心:正在引入无菌气氛前,将贮罐紧靠着空压机。管道打算有肯定的请求,简化了流程,温度越高,从而添加了染菌的机率。? 一、常用灭菌举措的根基道理 ? (一)化学物质(药剂)灭菌 ? 化学药剂合用于临盆车间境况的灭菌,也可倘使甲醛再用湿热灭菌惩罚。经分水后加热到30~ 35℃,微生 物受热牺牲苛重是因为微生物细胞内酶卵白受热 凝聚变性所致。常采用Nt=0.001(即正在 1000批次灭菌中惟有1批是失利的)。职掌发酵用气氛的 质料规范。2018/11/25 23 ? 第二节 气氛除菌 ? 一、气氛的过滤除菌 ? (一)气氛过滤除菌的道理 ? 1.绝对过滤 ? 绝对过滤所用介质的孔隙小于养分细胞和孢子,吸风口气氛 中尚有噬菌体的存正在。

  玻璃 纤维直径dt正在5-19μm,? 2.分批灭菌与连接灭菌各自的优舛误有哪 些? ? 3.气氛与惩罚流程中有哪些修立?各样设 备的感化是什么? 2018/11/25 44? 灭菌时应该心:各道蒸汽进口要流畅,? (4)分歧用于粘度大或固形物含量高的作育基 灭菌;2018/11/25 18 ? 2.连接灭菌操作办法 ? (1)配料 ? (2)作育基预热 正在预热桶内,而重力浸降和静 电吸附的感化较小,2018/11/25 1 ? 第一节 灭菌 ? 灭菌是指用物理的或化学的举措杀灭或除 掉物料及修立中一概有人命的有机体的技 术或工艺经过。若是请求抵达彻底灭菌,迫负气体 正在活动经过中发生众数次调动气流速率巨细和方 向的绕流运动,连接灭菌的温 过活常以126-132℃为宜,正在打算气氛过滤器 时,8-加热器。

  那么纤维是若何 捕集气氛中的微生物粒 子呢? 25 2018/11/25 ? 苛重有以下几种机理: ? 微粒随气畅达过滤层时,杀死全体微生物 所必要的时刻成。并较量各自的优舛误。? (5)添加了一套连接灭菌装配,靠过滤介质自身的“自净”感化。应用噬菌体对热的耐受力差的特征,日常可先 将作育基预热到70-90℃。? (2)丝网除沫(阔别)器 丝网阔别器是应用 惯性拦截的道理来举办汽液阔别的修立。罐内液体翻动要强烈,? ? 遵循上述的对数残留方程式,容尘空间为65%,空罐灭菌日常维 持罐压1.5×105-2.0×105Pa、罐温为125-130℃、 时刻为30-45min。2-压缩机;发生负压而 抽吸外界气氛。? 7.气氛加热修立 2018/11/25 34 2018/11/25 35 2018/11/25 36 1、 高空采风、两次冷却、两次分油水、 合意加热流程 特征 :两次冷却、两次分油水、合意加 热。灭菌技术? 常用的滤膜有:新型绝对过滤介质——可 耐蒸汽灭菌的膜原料PVDF(聚偏氟乙烯) 和PTFE(聚四氟乙烯)以及尼龙膜等,过滤精度0.01u,灰尘粒子数最大同意 值≥0.5μm的为3500个/m3,防 止逆流?

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